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Neue coronavirus Nukleinsäureentdeckung

July 27, 2021

Die Nukleinsäureentdeckung hat die Eigenschaften der Früherkennung, der hohen Empfindlichkeit und der Besonderheit und ist der „Goldstandard“ für die Diagnose der neuen kranzartigen Pneumonie. Z.Z. die weitverbreitetste Leuchtstoff quantitative RT-PCR Realzeittechnologie. Im Allgemeinen werden die zwei Ziele, die auf den ORF1ab- und n-Genen des Virus gelegen sind, ermittelt. Das gleiche Exemplar muss das doppelte Zielpositiv oder den wiederholten Test als das Positiv des einzigen Ziels treffen, oder die zwei Exemplare müssen das einzige Ziel gleichzeitig treffen, um das Positiv der Nukleinsäure des Virus zu bestätigen SARS-CoV-2.

 

1. Prinzip der Nukleinsäureentdeckungsausrüstung? Die einzigartige Genreihenfolge des Virus wird als das Entdeckungsziel verwendet. Durch PCR-Verstärkung die Ziel DNA-Sequenz wählen wir Zunahmen exponential. Jede verstärkte DNA-Sequenz kann mit einer Leuchtstoff-beschrifteten Sonde kombiniert werden, die wir im Voraus addierten. , Leuchtstoffsignal des Erzeugnisses, mehr Zielgene verstärkt, das stärker das angesammelte Leuchtstoffsignal. In den Proben ohne Virus, da es keine Zielgenverstärkung gibt, kann Nullrunde im Fluoreszenzsignal ermittelt werden. Deshalb ist Nukleinsäureentdeckung wirklich, zu bestimmen, ob es Virennukleinsäure in der Probe gibt, indem man die Ansammlung von Leuchtstoffsignalen ermittelt.

 

2. Was sind die Arten von Prüfungsproben der Nukleinsäure?

Im Allgemeinen nasale Putzlappen, Rachenabstriche, Nasenrachenraumputzlappen, Sputum, Bronchiallavageflüssigkeit, alveolare Waschungsflüssigkeit und so weiter.

 

3. Fünf-Schrittentdeckung das neue coronavirus Entdeckungsverfahren erfordert fünf Schritte: Probenahme, Beispielzurückhalten, Lagerung, Nukleinsäureextraktion und Computerprüfung. Dieses erfordert rigorose wissenschaftliche Experimente abzuschließen.

1. Wischen Sie die hintere Wand des pharyngeal Putzlappens und der bilateralen Tonsilla pharyngea 5-10mal jedes mit einem pharyngeal Putzlappen, ab und halten Sie, den Putzlappen zu drehen;

2. Medizinisches Personal wird angefordert, die Probe zu halten, und der Putzlappenkopf wird in der Zellbewahrungslösung untergetaucht, und das Endstück ist- defekt. Ziehen Sie die Rohrkappe sofort fest;

3. Speichern Sie, setzen Sie das Beispielrohr in eine Siegeltasche und sie für Inspektion zu senden in Zeit ein, und der Inspektionsprozeß erfordert eine strenge Transportumwelt, gespeichert bei 2-8 Grad Celsius.

4. Lassen Sie Nukleinsäureextraktion laufen, extrahieren Sie Nukleinsäure von der inaktivierten Virusprobe für folgende Entdeckung, und benutzen Sie automatisierte Ausrüstung, wie ein Nukleinsäureauszieher.

5. Nukleinsäureentdeckung Fluoreszenz PCR d.h. Maschinenentdeckung, dauert es 70-80 Minuten, damit der Auszug Leuchtstoffpcr-Verstärkungsreaktion durchmacht.

 

4. Was sind die Probleme mit Nukleinsäureentdeckung?

Das falsches Negativ, wegen der unsachgemäßen Probenahme, des unsachgemäßen Exemplarspeichers, des Gebrauches von verschiedenen Arten von Exemplaren und des Gebrauches der Reagenzien von den verschiedenen Herstellern möglicherweise veranlassen die Nukleinfeuerprobeergebnisse, „falsches Negativ“ und fehlende Diagnose zu sein;

Hohe Anforderungen für Entdeckungsausrüstung oder -plattformen, hohe Instrumente der Empfindlichkeit RT-PCR sind teuer und erfordern hohe Laborsauberkeit und -betreiber;

Nukleinsäureprüfung nimmt eine lange Zeit, und es dauert normalerweise 4-6 Stunden, um einen RT-PCR Test abzuschließen. Jedoch Beispieltransport, im Falle eines großen Rückstands von Proben betrachtend, können die Ergebnisse normalerweise gemeldet werden sobald 24 Stunden. Deshalb wenn die Nukleinfeuerprobe negativ ist, kann der Zusatz von Antikörper IgM und IgG Entdeckung die Mängel wieder gutmachen, die die Nukleinfeuerprobe wahrscheinlich ist, zu verursachen fehlender Diagnose.